中文字幕人成无码人妻综合社区|国内精品人妻无码久久久影院蜜桃|国产精品人妻一区二区三区四|在线观看国产一区二区三区

網(wǎng)站導(dǎo)航

技術(shù)文章

當(dāng)前位置:主頁 > 技術(shù)文章 > 凍干法制備菌種:微生物菌種真空冷凍干燥保存法

凍干法制備菌種:微生物菌種真空冷凍干燥保存法

更新時間:2024-08-15 點擊次數(shù):3171

微生物菌種可以采用凍干法進行保存。凍干法制備的菌種具有保存周期長,易活化,保存存活率高。具體方法步驟如下:

1準(zhǔn)備安瓿瓶用于真空冷凍菌種保藏安瓿瓶宜采用中性玻璃制造形狀可用長頸球形底的。大小要求外徑6~7.5mm,長105 mm,球部直徑9~11 mm,壁厚0.6~1.2 mm,也可用沒有球部的管狀安培管。先用2%鹽酸浸泡8~10h,再經(jīng)自來水沖洗多次,用蒸餾水涮洗2~3次,烘干;在每管內(nèi)放入打好菌號及日期的標(biāo)簽,字面朝向管壁,管口塞好脫脂棉塞,121℃下高壓滅菌20分鐘備用。

2準(zhǔn)備菌種用真空冷凍干燥法保藏的菌種保藏期可長達(dá)幾年甚至幾十年為了活性高,保存期長,所用菌種純度要高而且菌齡要適宜。細(xì)菌和酵母菌的菌齡要求超過對數(shù)生長期若用對數(shù)生長期的菌種進行保藏其存活期反而降低。一般細(xì)菌的菌齡要求24~48h酵母菌為3d形成孢子的微生物則宜保藏孢子放線菌和絲狀真菌菌齡為7~10d。

3保護劑的選擇和準(zhǔn)備選取新鮮牛奶作為保護劑牛奶采用脫脂牛奶,用離心方法去除上層油脂115℃下高壓蒸汽滅菌25min,備用。或者采用微生物專用凍干保護劑配方可以保持更高的活性。我公司針對微生物凍干開發(fā)保護劑,確保微生物高活性凍干。

4菌種準(zhǔn)備及分裝菌種每支長好的斜面加2~3ml保護劑用接種環(huán)將菌苔輕輕刮起(注意勿刮起培養(yǎng)基制成菌懸液。如用液體培養(yǎng)的菌種,則需經(jīng)離心收集和用滅菌生理鹽水洗滌細(xì)胞收集的菌體用保護劑懸浮制成菌懸液。懸液中菌數(shù)要求達(dá)到108~1010/ml為宜。懸液制備完成盡快分裝和凍結(jié)。分裝安瓿時可用滅菌滴入安瓿管底部每管分裝量約0.1~0.2毫升分裝安瓿管時間盡量要短最好在1-2小時內(nèi)分裝完畢并預(yù)凍。分裝時應(yīng)注意在無菌條件下操作。

5預(yù)凍-80℃冰箱預(yù)凍1~2小時或者在凍干機內(nèi)預(yù)凍3-6個小時

6冷凍干燥將冷凍后的樣品安瓿管置于冷凍干燥機的干燥箱內(nèi)開始冷凍干燥時間一般為8-20小時。終止干燥時間應(yīng)根據(jù)下列情況判斷:①安瓿管內(nèi)凍干物呈酥塊狀或松散片狀;②真空度接近空載時的極限真空③選用1-2支對照管其水份與菌懸液同量視為干燥完結(jié)。

7封口抽真空干燥后取出安培瓶接在封口用的玻璃管上可用L形五通管繼續(xù)抽氣,約10min即可達(dá)到26.7Pa(0.2mmHg。于真空狀態(tài)下,以煤氣噴燈的細(xì)火焰在安培管頸中央進行封口。

8保藏安瓿管保藏在-20℃冰箱里。

9、凍干法保存的菌種活化如果要從中取出菌種恢復(fù)培養(yǎng),可先用75%酒精將管的外壁消毒用鑷子敲下已開裂的安瓿管的頂端使管子破裂在安瓿管中加入0.5~1ml液體培養(yǎng)基慢慢旋轉(zhuǎn)安瓿管使凍干菌種復(fù)水然后直接接種到瓊脂斜面或涂布平板。凍干法保存的菌種方便活化,活性高。


如果您有任何問題,請跟我們聯(lián)系!

聯(lián)系我們

版權(quán)所有 © 2019 蓓迪(北京)科技有限公司 京ICP備20009046號-1 技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng) 管理登陸 GoogleSitemap

公司暢銷產(chǎn)品:中試凍干機,中試?yán)鋬龈稍?制藥凍干機,實驗室凍干機

在線客服 聯(lián)系方式 二維碼

服務(wù)熱線

13520353164

掃一掃,關(guān)注我們

主站蜘蛛池模板: 一色屋精品视频在线观看免费| 又爽又黄又无遮挡的视频在线观看| 日本一卡精品视频免费| 亚洲精品一区二区三区在线| 日韩精品久久久免费观看| 亚洲国产色播av在线| 亚洲伊人久久精品影院| 精品无码成人片一区二区98| 久久久国产乱子伦精品作者| 天天躁日日躁狠狠躁av中文| 真实国产乱啪福利露脸| 区二区欧美性插b在线视频网站| 无码137片内射在线影院| 亚洲欧美一区二区三区在线| 国产口爆吞精在线视频| 久久精品人人做人人爽电影| 国产精品99久久99久久久不卡| 中文字幕 亚洲 无码 在线| 欧美精品偷自拍另类在线观看 | 色婷婷综合中文久久一本 | 综合久久综合久久88色鬼 | 麻豆av久久无码精品九九| 久久婷婷五月综合色国产免费观看| 亚洲另类精品无码专区| 粗大的内捧猛烈进出少妇| 色综合色狠狠天天综合网| 精品国产乱码久久久久久乱码| 在线观看国产午夜福利片| 中国少妇videos呻吟| 国色天香社区在线视频| 亚洲线精品一区二区三区影音先锋| 婷婷五月综合激情| 亚洲啪av永久无码精品放毛片| 无码日韩人妻精品久久| 欧美大黑帍在线播放| 亚洲欧美18v中文字幕高清| 久久婷婷丁香五月综合五| 99久久精品毛片免费播放高潮| 欧美成人免费全部观看国产| 欧美videos另类极品| 理论片午午伦夜理片影院|